p14臭氧对乙肝病毒灭活效果检测(一)

臭氧对乙肝病毒灭活效果检测

《丁柳,雷学忠,刘丽,张金秀
(华西医科大学附属第一医院,四川成都610041 )


【中图分类号】R575.1【文献标识码】B【文章编号】1004 - 0501 ( 2001 ) 06 - 0535 - 02
臭氧是一种强氧化剂具有广谱杀菌灭毒作用。本研究通过采用释放臭氧的化验单消毒箱和室内杀菌机对乙肝 病毒HBsAg的破坏和HBV-DNA的灭活作用进行探讨,从而寻找一种方便而切实可行的消毒方法。

1材料和方法

1.1材料:化验单消毒箱(KY-938型)、消毒杀菌机(K60-150型壁挂式):所有操作按说明书进行。HBsAg 检测试剂盒:购自上海华美生物工程公司,批号980908。Dig—HBV DNA探针标记试剂盒:购自德国宝灵曼公司,余试剂均为购自国内外大公司的分析纯试剂,所有检测步骤均严格按操作说明书进行。全自动酶标仪:450 型,购自美国BIORAD公司。

1.2试验方法:①在1.5cmX 1.5cm滤纸片中,滴加HBsAg和HBV—DNA均阳性的感染血清20μl,自然晾干。②将经处理的滤纸片分成5组放入化验单消毒箱内,按10, 20, 25, 30及40分钟消毒不同时间,操作步骤 严格按说明进行,然后分别自消毒箱取出,重复试验5次,待检。在10m2的密闭室内,将同样经处理的4组滤纸片分别放于距臭氧消毒杀菌机1, 2, 3及4米处,按杀机规定程序消毒2小时,重复试验5次,然后收集各滤 纸片,待检。
1.2.1检测方法:将上述消毒后的待检滤纸片,按《消毒技术规范》方法0.01 M磷酸盐缓冲液(pH7.4) 200μl反复洗涤,将洗脱液进行HBsAg和HBV—DNA检测,所有结果均经重复两次检测确证。

1.2.2对照组设立及结果判定:对照组除不经上述臭氧发生器处理外,余均同试验组。HBsAg ELISA检测结果判定:测试标本OD值≥阈值为阳性,OD值< 阈值为阴性。HBV DNA斑点杂交检测结果判定:出现蓝紫色 斑点为阳性,反之则为阴性

未完待续......